Institut de recherche biomédicale
     

    Approches méthodologiques

    •  

     

     

    - Analyses in vivo :

    •    analyse neuro-anatomique de différentes souches de souris mutantes pour des gènes d'intérêt, par hybridation in situ et immunofluorescence, sur cryocoupes, coupes vibratome, ou tissus in toto.

    •    Techniques de traçages de voies axonales, par transport de carbocyanines (ex: DiI) rétrograde ou antérograde.

    •    Identification des sites d’expression de petites GTPases actives et reconnues par des effecteurs spécifiques marqués sur des coupes de tissus (ref: Causeret et al., 2004).

    •    Mesure de  l’activté des petites GTPases dans des extraits de tissus nerveux.

    •    Immuno-précipitations à partir d’extrait de tissus.

     

     - Différentes techniques de culture de neurones in vitro :

    •    en ex vivo en réalisant des cultures organotypiques de bulbes rachidiens ou de tranches de SNC.

    •    des cultures d’explants de SNC en matrice de collagène face à des souces de facteurs diffusibles

    •    des cultures de neurones dissociés .

     

    - Approches pharmacologiques

    : application de toxines bactériennes ou de composés chimiques permettant l'analyse des voies de signalisation.  

    - Enregistrements par vidéo-microscopie

      des axones et des corps cellulaires.

    - Transfection

    par électroporation de plasmides d’expression dans les neurones post-mitotiques au sein de tissus nerveux ou des neurones primaires dissociés.